2021年6月26日,中科合创(北京)科技成果评价中心组织专家,召开了由大连民族大学、大连海关技术中心、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、中国检验检疫科学研究院共同完成的“转基因产品微流控芯片筛查与品系鉴定关键技术及标准化应用”项目科技成果评价会。与会专家听取了项目承担单位所做的工作总结报告、技术报告,审阅了科技查新报告、应用证明、经济效益证明、知识产权证明等资料,经质询、讨论,形成评价意见如下:
1.提供的评价资料齐全、规范,符合科技成果评价要求。
2.该成果针对国际最新的转基因产品高通量筛查、新品系鉴定技术需求,基于微流体芯片技术,数字PCR、qPCR、电场诱导释放与检测(EFIRM)技术和分子拼接技术,开展了转基因产品高通量和新品系精准检测的分析方法研究、关键技术创新、标准样品开发等研究,实现了转基因产品的微流体芯片高通量筛查、新品系精准检测及标准样品的量值溯源保障,并形成标准推广应用。
3.主要创新点:
(1)自主设计适于并行化核酸扩增的分子标记引物探针,基于TaqMan荧光PCR结合微流体芯片技术,创建了17种转基因玉米靶标、10种转基因油菜靶标、10种转基因饲料靶标的微流体芯片高通量筛查检测方法。实现了一次PCR扩增,同时完成多个靶标外源重组品系的筛查检测,并结合预制冷冻技术包被微流控芯片,研发高通量筛查芯片试剂盒。
(2)利用染色体步移测序技术破译了8种转基因新品系的外源插入边界序列,并基于数字PCR、qPCR、电场诱导释放与检测(EFIRM)技术,创建了对3种转基因大米(LL62品系、T2A-1品系、T1C-19品系)、1种转基因玉米(MON87712品系)、2种转基因棉花(GHB119品系、T304-40品系)、1种转基因亚麻籽(FP967品系)、1种转基因大豆复合品系(MON87708×MON89788品系)等8种新品系特异性识别和复合品系鉴定新方法;首次研发捕获探针精准捕获转基因外源插入序列,创新性将EFIRM技术应用于转基因成分检测。
(3)通过大片段克隆和分子拼接技术,首次构建了转基因外源插入片段叠加分子标准样品,并运用数字PCR技术精准定量评价,研发了17种转基因大豆品系、12种转基因油菜籽品系的分子标准样品;首次研制转基因苜蓿、康乃馨、大豆和油菜等30余种品系国家标准样品。
4.该项目核心成果具有原创性,核心技术拥有自主知识产权。授权发明专利14项,发表论文32篇(其中SCI 17篇),出版论著2部,形成国家标准和行业标准28项,成果转化6项。在海关、农业、市场监督、第三方检测机构、相关企业等得到了广泛应用,取得了显著的经济和社会效益。
综上,该成果整体水平达到国际先进,其中,在国际上首创了8种转基因新品系鉴定方法。
专家组成员
郑文杰 天津师范大学研究员
薛 峰 南京农业大学教授
李 斌 沈阳农业大学教授
赵前程 大连海洋大学教授
朱水芳 中国检验检疫科学研究院研究员
徐敦明 厦门海关技术中心研究员
王伟利 长春海关技术中心研究员